新型冠状病毒总抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

作

者：疾控科研试剂博客（江经理）百度搜索

说明书

通用名：新型冠状病毒总抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：SARS-CoV-2TotalAbELISAKit

96测试/盒

本试剂盒采用双抗原夹心法原理检测血清/血浆中的SARS-CoV-2（-nCOV）抗体。预先采用SARS-CoV-2spike

RBD蛋白包被固相酶标板，若样本中含有SARS-CoV-2抗体（包括IgM、IgG、IgA等），则与包被板结合，再与加入的辣

根过氧化物酶标记SARS-CoV-2spikeRBD蛋白结合，形成固相抗原-抗体-酶标抗原的夹心复合物，洗涤除去未结合的酶标

记物，加入HRP底物显色液显色，酶标仪读数，根据临界值（Cut-off值）判断样本中是否含有SARS-CoV-2（-nCOV）

抗体。

96人份

1.包被板1块×96孔/块

2.阴性对照1瓶×1ml/瓶

3.阳性对照1瓶×1ml/瓶

4.酶标记物1瓶×6ml/瓶

5.底物显色液A1瓶×6ml/瓶

6.底物显色液B1瓶×6ml/瓶

7.终止液1瓶×6ml/瓶

8.20倍浓缩洗涤液1瓶×30ml/瓶

9.不干胶封板膜3张

10.自封袋1个

11.说明书1份

[试剂准备]

1.在开始实验之前，样品和试剂应室温（20～27℃）平衡30分钟。

2.洗涤液配制：请在使用前确保浓缩洗涤液无结晶析出，如发现有结晶析出，请放置水浴锅中加热溶解，然后在适当的

洁净容器内用新鲜制备的蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液1:19稀释,如30mL浓缩洗涤液加蒸馏水稀释至mL；此溶液

可在2～8℃下稳定2周。

[操作程序]

1．实验设计：将包被板从密封袋中取出，根据所需数量在板架上放好微孔板条。设空白对照1孔，阴性对照品和阳性

对照品孔各2孔。

2．加样：依次分别加入阴/阳性对照品、样品、质控品50μL。

3．加酶：空白孔除外，每孔加入酶标记物μL。

4．温育：用新的封板膜封盖反应板，37℃温育60分钟。

5．洗板：取出微孔板，吸干微孔板中所有液体，每孔加入稀释好的洗涤液μL，浸泡至少10秒，吸干。如此洗

板5次，最后在干净的吸水纸上拍干。

6．加底物液：每孔先加入底物显色液A50μL（或1滴），再加入底物显色液B50μL（或1滴）。

10.温育：用微量振荡器充分振荡混匀，用封板膜封盖反应板，37℃温育15分钟；11.加终止液：每孔加入终止液50μL（或1滴），轻轻振荡混匀。

12.读数：设定酶标仪波长于nm处（建议用双波长检测），用空白孔调零点后测定各孔OD值。

1．临界值（CUTOFF）＝2.1×阴性对照孔平均OD值；阴性对照低于0.05按0.05算。

2．待测样品OD值≥临界值的为有反应性。

3．待测样品OD值＜临界值的为无反应性。

1．所有检测应根据国家有关部门颁布的相关实验室规范和要求进行操作，严格防止交叉污染。本产品中所有含有人源

性物质经过检测乙型肝炎病毒表面抗原、人类免疫缺陷病毒（HIV-I型和Ⅱ型）抗体、丙型肝炎病毒抗体、梅毒螺旋体抗体

为阴性。因为没有已知方法能全面确保无传染物质存在，故所有试剂组分、样品、洗弃液和各种废弃物都应当按传染物处

理。

2．避免在有挥发性物质及次氯酸类消毒剂（如84消毒液）的环境下操作。建议使用二氧化氯消毒片剂或消毒粉消

毒。

3．操作前应仔细阅读使用说明书，严格按照说明书的操作程序进行，实验室温度应控制在20～27℃。

4．各试剂必须摇匀后使用，用前应平衡到室温，严格控制每步反应的时间和温度。加样操作应快速准确手法一致，慢

吸快打，不要使溶液粘到孔壁上或产生气泡，尽量缩短整个加样时间。

5．洗涤时各孔均需加满洗液，设定30～60秒浸泡时间，防止孔口有游离酶不能洗净。在洗板结束后，必须立即进行

下一步，不可使酶标板孔干燥。以洗板机洗板时，应注意检查加液头是否堵塞，洗板结束后应在干净无纸屑的吸水纸上拍

干。

6．加样品和液体试剂时必须用加液器加注，并经常校对其准确性。加入不同样品或不同试剂组分时，应更换加样器吸

头和加液槽，以防止出现交叉污染。

7.为防止样品蒸发及避免污染，温育时应将反应板放于密闭干净的塑料袋内或用封板膜覆盖；封板膜不能重复使用。

8.包被板要干燥保存，用完后要立即放入装有干燥剂的干净塑料袋内，密闭防潮保存，使用后的剩余试剂盒应密封并

及时放回2～8℃保存。

9．浓缩洗涤液为高浓度磷酸盐缓冲液，在温度低时，可能会有结晶析出；请在使用前确保浓缩洗涤液无结晶析出，如

发现有结晶析出，请放置水浴锅中加热溶解，否则会影响洗涤效果。

2~8℃，避光